Wydzielone PRR- Białka te są substancjami rzadkimi w organizmie. Dla „ogonów” tych cząsteczek na błonach fagocytów znajdują się specjalne receptory, które zapewniają transfer informacji z komórki do wrodzonego układu odpornościowego. Proteazy serynowe 1 i 2, związane z lektyną wiążącą mannę (Maspl i Masp2), są podobne do proteaz klasycznego szlaku aktywacji dopełniacza C1r i C1s. Jednakże proteazy pektyny wiążącej mannę są aktywowane po związaniu z ligandem drobnoustrojowym.

Endocytotyczne PRR zlokalizowane na powierzchni fagocytów. Po rozpoznaniu mikrobiologicznych PAMP, PRR pośredniczą w niszczeniu patogenu i dostarczaniu go do lizosomów w celu degradacji. Przetworzone peptydy są prezentowane przez cząsteczki MHC na powierzchni makrofagów limfocytom T. Endocytotyczny PRR jest poprzedzony receptorem mannozy makrofagów, który rozpoznaje końcową mannozę i nadmiar fukozy na ścianach komórkowych drobnoustrojów i pośredniczy w ich fagocytozie. Innym endocytotycznym PRR jest receptor zmiatający makrofagi, który rozpoznaje ligandy polianionowe (części DNA, LPS, kwas lipotejchojowy), gdy jest związany ze ścianą bakterii, wspomaga usuwanie bakterii z krwawienia. PRR wzmacnia funkcje fagocytarne czynników wrodzonej odporności i zapewnia usunięcie wszystkich uszkodzonych fragmentów komórek.

Sygnał PRR rozpoznają PAMP i aktywują szlaki przekazywania sygnału dla ekspresji różnych genów odporności, w tym cytokin prozapalnych.Do tej klasy receptorów zaliczają się receptory konserwatywne ewolucyjnie, tzw. receptory Toll-podobne (TLR), czyli „komórki dzwoniące” na błonie, „które powiadamiają o przybyciu nieznajomego” .

Receptory Toll-podobne (TLR). Pierwszy receptor Toll, który reaguje na wzorce mikroorganizmów zidentyfikowanych u Drosophila. Zidentyfikowano je z genem odpowiedzialnym za powstawanie polarności grzbietowo-brzusznej w embriogenezie, a także zapewniającym wrodzoną odporność na grzyby.

Cytoplazmatyczny domena Receptor IL-1 i receptor Toll u Drosophila, zwane domeną TIR (domena homologii Toll/IL-1), mogą być homologiczne do Bud i indukować szlaki przekazywania sygnału, które aktywują transkrypcję czynnika jądrowego-κB (NF-κB).

Niezależnie od faktu, że różne receptory TLR i NOD wytwarzają specyficzne ligandy, to jednak postreceptorowe szlaki sygnałowe prowadzą do aktywacji NFkB. Kaskada sygnalizacyjna rozpoczyna się od produkcji cząsteczek białka adaptorowego MyD88, IRAK i TRAF6, co prowadzi do aktywacji IKK, która z kolei fosforyluje IKB, kierując go do zabijania i rozkładu pod proteasomami 26S. W ten sposób NFkB zostaje przeniesiony do jądra i łączy się z DNA, co prowadzi do transkrypcji genu.
IkB – inhibitor kappa B;
IkK – kinaza IkB;
IL – interleukina; IRAK – kinaza związana z receptorem IL-1;
NFkB – czynnik jądrowy kappa B;
NOD - domena oligomeryczna wiążąca nukleotydy;
P – fosforylacja;
TLR – receptory Toll-podobne;
TNF – czynnik martwicy obrzękowej;
TRAF6 – czynnik 6 związany z TNF;
dsRNA - dsRNA;
LPS – lipopolisacharydy.

Homologi Drosophila Toll Nazwę receptory Toll-podobne usunięto ze Ssawian. U ludzi jeden z pierwszych zidentyfikował TLR4. Receptory TLR stymulują aktywację szlaku sygnałowego NF-kB poprzez ekspresję różnych cytokin i cząsteczek kostymulujących, co jest czynnikiem krytycznym w tworzeniu nabytej odpowiedzi immunologicznej. W związku z tym przyjmuje się założenie o funkcjonowaniu TLR jako receptora wrodzonego układu odpornościowego. Istnieje około 23 członków rodziny receptorów Toll-podobnych u ludzi (TLR-TLR23), chociaż nie wszyscy z nich zostali dobrze scharakteryzowani. U Mishy nie wykryto TLR10, ale wykryto TLR11. Misze z defektem genu TLR11 są wrażliwe na infekcje uropatogenne.

Receptory transbłonowe Toll-podobne charakteryzuje się poklinicznym końcem NH i wewnątrzklinicznym końcem COOH. Domena TIR (domena homologiczna Toll/IL-1) TLR, która składa się z 200 aminokwasów i zawiera trzy wysoce konserwatywne części, pośredniczące w interakcji pomiędzy receptorami Toll-podobnymi a cząsteczkami ułatwiającymi przekazywanie sygnału I.

Receptory Toll-podobne Wyrażany na komórkach wytwarzających pierwszą linię ochrony - neutrofile, makrofagi, DC, komórki śródbłonka i nabłonka tkanek śluzowych. Niedawno odkryto, że ludzkie komórki NK wykazują receptory: TLR3, TLR7 i TLR8. TLR1, TLR2, TLR4, TLR5, TLR6 i TLR11 rozprzestrzeniają się na powierzchni tkanki. TLR7, TLR8 i TLR9, które rozpoznają struktury podobne do kwasów nukleinowych, są zlokalizowane wewnątrzkomórkowo.

TLR1(gen zlokalizowany na chromosomie 4p14) ulega silnej ekspresji na komórkach śledziony i komórkach obwodowych. Uważa się, że receptory TLR1 działają jako koreceptory, ale nie zidentyfikowano bezpośrednich ligandów receptorów, a dokładna funkcja pozostaje niejasna. Wykazano, że w połączeniu z receptorami TLR2 smród bierze udział w typie triacylowanej lipoproteiny.

TLR2(4q 31/3-32) odgrywają kluczową rolę w odpowiedzi na produkty bakterii Gram-dodatnich, prątków i drożdży. Szerokie spektrum rozpoznawania wzorców TLR2 (peptydoglikanów, lipoprotein i kwasów lipotejchojowych ściany komórkowej) wiąże się z możliwością tworzenia przez te receptory heterodimerów z innymi receptorami TLR. TLR2 tworzy dimery z TLR6 i bierze udział w rozpoznawaniu peptydoglikanów i diacylowanych lipopeptydów bakterii Gram-dodatnich i mykoplazm. Dimeryzując z TLR1, receptor rozpoznaje triacylowane lipoproteiny, takie jak Borrelia burgdorferi OspA.

TLR3(4q35) rozpoznają mononukleotydowy RNA, strukturę molekularną wirusów, ale nie przekazują sygnału z jednokolumnowego RNA lub DNA. W Misha, defіcytykh dla TLR3, vIDPOVIDI-Polinosin-Politidine (syntetyczny analog RNA DvoLoland), Todi Yak Chutlivist Klitin, ShO Expreset TLR3, na nyoy zbayghagat.

Sered Usikh TLR najwyższy poziom TLR4 (9q32-33). Wyraża się w organizmie na powierzchni makrofagów, neutrofili, DC, limfocytów T, B i innych. Jednakże u myszy pozbawionych genu TLR2 odpowiedź na LPS zostaje zachowana. W rozpoznawaniu za pośrednictwem TLR bierze udział funkcja białek MD2, a rozpoznawanie LPS odbywa się za pomocą kompleksu składającego się z kilku składników: CD14, TLR4, MD2. TLR4 i MD2 znajdują się w miejscu wiązania, a CD14 jest nabywany przed kompleksem po związaniu LPS.

Przesyłanie pieniędzy do robota do bazy jest łatwe. Vikorist poniższy formularz

Studenci, słuchacze studiów podyplomowych, młodzi ludzie, którzy w nowej pracy mają solidną wiedzę, będą Ci jeszcze bardziej wdzięczni.

Wysłany dnia http://www. wszystkiego najlepszego. ru/

Wchodzić

Receptory Toll-podobne (TLR) są głównymi składnikami wrodzonego układu odpornościowego, które pośredniczą w specyficznym rozpoznawaniu ewolucyjnie konserwatywnych struktur molekularnych patogenów (PAMP – patogenetyczne wzorce molekularne). Receptory Toll-podobne są obecne na komórkach różnych typów - od nabłonkowych po immunokompetentne. Najwyraźniej, gdy TLR wiąże się z ciężkimi ligandami, aktywowanych jest wiele białek adaptorowych i kinaz, które biorą udział w indukcji kluczowych czynników prozapalnych. Indukcja ta implikuje rozwój obu typów odporności wrodzonej w wyniku zwiększonej ekspresji niskich białek antyapoptotycznych, cytokin prozapalnych, białek przeciwbakteryjnych oraz rozwój typów odporności poprzez dojrzewanie komórek dendrytycznych, prezentację antygenu itp.

Ze względu na swój charakter, agonizm receptorów Toll-podobnych okazał się skuteczny nie tylko w terapii chorób zakaźnych, ale także w leczeniu chorób zakaźnych, jako środek wspomagający w chemioterapii różnych nowych produktów złośliwych. Jednakże do chwili obecnej opisano zasadniczo odmienny wpływ TLR na puch. Z jednej strony wykazano, że receptory TLR (i ich ligandy) mogą działać jako supresory obrzęku, z drugiej strony TLR mogą stymulować postępujący obrzęk i przyczyniać się do utrzymywania się obrzęku przed chemioterapią. Przegląd ten zawiera dane dotyczące napływu receptorów TLR i ich agonistów na wzrost pulchności, a także analizuje główne mechanizmy leżące u podstaw tych zmian.

Lista jest krótka. TLR – receptory Tol-podobne; LPS – lipopolisacharyd; NF-kB – jądrowy czynnik transkrypcyjny kB; PRR – receptory rozpoznające wzorce; PAMP – wzorce molekularne związane z patogenami; DAMP – wzorce molekularne związane z chorobami; IRF – czynnik regulujący interferon, os dsRNA – jeden i podwójny kwas rybonukleinowy; TNF-b – czynnik martwicy pęczniejącej b; IL – interleukina; IFN – interferon; Komórki NK – komórki naturalne; miRNA – mały interferujący RNA; TGF jest transformującym czynnikiem wzrostu.

1. Historia odkryć

Receptor immunologiczny, patogen przeciwnowotworowy

W 1985 roku słynna niemiecka biolog Christiane Nüsslein-Volhard zidentyfikowała zmutowane larwy ze słabo rozwiniętą brzuszną częścią ciała w obecności dalszych mutacji u muszki owocowej. To świetna replika Das war ja toll! („Otse klas!”). Epitet „klasyczny” został później nazwany możliwym do zidentyfikowania genem, jak go nazywam.

W 1996 roku odkryto, że gen ten jest odpowiedzialny nie tylko za polaryzację grzbietowo-brzuszną podczas rozwoju embrionalnego, ale także za odporność Drosophila na infekcję grzybiczą. Praca francuskiego naukowca Julesa Hoffmana została uhonorowana Nagrodą Nobla w 2011 roku. W 1997 roku Ruslan Medzhitov i Charles Genuys z Uniwersytetu w Else odkryli u sawantów homologiczny gen podobny do toll (infekcja nazywa się TLR4). Okazało się, że TLR4 wyzwala aktywację czynnika jądrowego kappa-B NF-κB w taki sam sposób jak interleukina-1. Nareshti, 1998 odkryto, że ligandem receptora jest składnik ściany komórkowej bakterii Gram-ujemnych, lipopolisacharyd.

2. TLR układu odpornościowego

2.1 Struktura TLR

Zgodnie z organizacją strukturalną, receptory TLR należą do rodziny receptorów IL-1 (IL-1R). TLR to białka transbłonowe, które ulegają ekspresji na powierzchni tkanki i w przedziałach subkomórkowych (takich jak endosomy). Lokalizacja TLR jest związana z rodzajem rozpoznawanego przez nią ligandu. I tak, na powierzchni komórek zlokalizowane są TLR 1, 2, 4, 5, 6, które wiążą składniki strukturalne bakterii, a także TLR 3, 7, 8, 9, które są ważne dla rozpoznawania struktur związanych z wirusami - nukleinowych kwasy (dsRNA, ssRNA, DNA), zlokalizowane w endosomach, gdzie oddziałują z ligandami po deproteinizacji wirionów

Struktura TLR zawiera N-końcową domenę bogatą w leucynę (LRR), która jest odpowiedzialna za wiązanie liganda, domenę transbłonową i C-końcową wewnątrzkomórkową domenę sygnalizacyjną (homologiczną z wewnętrzną domeną IL-1R).

Receptory TLR ulegają ekspresji w większości typów komórek w organizmie człowieka, w tym w niehematopoetycznych komórkach nabłonkowych i śródbłonkowych. Wiele z jednocześnie wyrażanych receptorów TLR jest specyficznych dla typu komórek skóry, a największą liczbę TLR można znaleźć w komórkach krwiotwórczych, takich jak makrofagi, neutrofile i komórki dendrytyczne.

Zidentyfikowano 13 różnych receptorów TLR u ludzi, 10 u ludzi i 12 u myszy. Receptory TLR od 1 do 9 są konserwatywne u ludzi i myszy. Prote є ідмінністі. Gen kodujący TLR10 występuje tylko u ludzi, a TLR11 występuje u obu gatunków, ale jest mniej funkcjonalny u myszy.

Główna cecha TLR, która stymuluje ich rodzaj receptorów rozwiniętego układu odpornościowego (receptory komórek Ti B), polega na ich zdolności do rozpoznawania nie unikalnych epitopów, ale konserwatywnych ewolucyjnie i szeroko reprezentowanych struktur molekularnych związanych z patogenami (PAMP). we wszystkich klasach mikroorganizmów i wirusów, niezależnie od rodzaju chorobotwórczości. Specyfika rozpoznawania PAMP jest dobrze ustalona w większości receptorów TLR, w tym w ligandach TLR 1-9 i 11 (ryc. 1). Biologiczna rola i specyficzność TLR10 (człowiek), 12 i 13 (mysz) są nieznane.

Najpopularniejsze mikrobiologiczne ligandy TLR:

lipopeptydy bakteryjne, kwas lipotejchojowy i peptydoglikany; lipoarabidemannan z prątków; składnik ściany komórkowej grzybów, zymosan, który wiąże się z TLR2, tworząc heterodimery TLR1, TLR6 i CD14;

LPS z bakterii Gram-ujemnych, ligand TLR4;

składnik wici u bakterii – flagelina, która aktywuje TLR5; profilowane struktury pierwotniaków, które wiążą się z TLR11;

DNA (niemetylowane sekwencje CpG) rozpoznawane przez TLR9;

dsRNA – ligand TLR3;

ssRNA - ligandy TLR7 i TLR8.

Niedawno wykazano, że receptory TLR mogą być aktywowane przez dużą liczbę endogennych cząsteczek - alarmin (kwas hialuronowy, białka szoku cieplnego itp.), które pojawiają się, gdy tkanki ulegają uszkodzeniu. Te heterogeniczne z natury i struktury molekularnej (PAMP i alarmy), które są rozpoznawane przez TLR, łączą się obecnie w jedną rodzinę, którą nazywa się DAMP (wzorce molekularne związane z uszkodzeniami).

2.2 Oddziaływania TLR z ciężkimi ligandami

Teraz, po opisaniu budowy i funkcji TLR, przejdźmy do tych, które spalają się po związaniu z wysokimi ligandami.

Wiązanie liganda z TLR inicjuje kaskadę sygnałów, które zasilają cytoplazmatyczne domeny TIR TLR. Sygnał z domeny TIR poprzez cząsteczki adaptorowe MyD88 (czynnik różnicowania szpiku 88), TIRAP (adaptery specyficzne dla domeny TIR), TICAM1 (TRIF), TICAM2 (cząsteczka adaptorowa zawierająca TIR) jest przekazywany do kinaz liniowych (TAK, IKK , IKK JNK, p38 , ERK, Akt itp.), które w różny sposób aktywują czynniki transkrypcyjne (NF-kB, AP-1 i IRF), odpowiedzialne za ekspresję różnych czynników prozapalnych i przeciwdrobnoustrojowych. W tym przypadku wszystkie receptory TLR, w tym TLR3, przekazują sygnał do kinaz vikorystycznych i MyD88. TLR3 przesyła sygnał przez TICAM1, TLR4 przez MyD88 i przez TICAM1.

Aktywacja tego i innych urzędników jest wskazywana przez rodzaj TLR, do którego przesyłany jest sygnał. Zatem prawie wszystkie receptory TLR (TLR2 i jego koreceptory – TLR1 i TLR6, a także TLR4-9, TLR11), związane z wysokimi ligandami, aktywują NF-kB – jeden z głównych czynników regulujących ekspresję m.in. cytokin prozapalnych in, jaka IL-1, -6, -8 i przed aktywacją innej rodziny prozapalnych czynników transkrypcyjnych - IRF indukują transmisję sygnału przez TLR3, 4, 7-9. Sygnały przekazywane przez TLR3 lub TLR4 prowadzą do aktywacji IRF3, który reguluje ekspresję IFN i jest krytycznym składnikiem przeciwwirusowej odpowiedzi immunologicznej. Sygnalizacja za TLR7-9 prowadzi do aktywacji IRF5 i IRF7 oraz ekspresji IFN-b, który również odgrywa istotną rolę w obronie przeciwwirusowej. Sygnalizacja poprzez TLR2 i TLR5 nie powinna nastąpić, dopóki nie zostaną aktywowane czynniki z rodziny IRF.

Zatem interakcja typu TLR z silnym ligandem inicjuje uruchomienie kaskady sygnalizacyjnej, która prowadzi do aktywacji ekspresji określonych genów (cytokin, cząsteczek przeciwdrobnoustrojowych itp.). Jednak w tym momencie następuje znaczna aktywacja szlaków sygnałowych opóźnionych przez TLR i zapobiega się rozwojowi dalszych skutków, które są nieuzasadnione. Dostępna literatura naukowa zawiera obszerne dane charakteryzujące nowe zmiany transkryptomiczne i proteomiczne obserwowane w rodzaju aktywacji receptorów TLR pieśni.

3. Funkcje TLR

Funkcje receptorów TLR występujących w organizmie można przypisać rodzinie PRR, które pośredniczą w specyficznym rozpoznawaniu ewolucyjnie konserwatywnych struktur patogenów (PAMP – pathogen Associates Molekularne Wzory). W połączeniu z PAMP, receptory TLR aktywują wrodzony układ odpornościowy i w dużej mierze implikują rozwój odporności nabytej. Najbardziej konserwatywną rolą TLR jest aktywacja odporności przeciwdrobnoustrojowej w skórze, błonach śluzowych dróg oddechowych, żołądkowo-jelitowych i moczowo-płciowych.

TLR rozpoznają cząsteczki drobnoustrojów, które prowadzą do rozwoju reakcji zapalnych spowodowanych aktywacją czynnika NF-kB, który reguluje ekspresję cytokin prozapalnych (TNF-b, IL-1, IL-6 itp.) i chemokin (MCP -1, MCP-3, GMCSF i in.).

TLR bierze udział w regulacji transkrypcyjnej i potranslacyjnej (rozszczepienie proteolityczne i wydzielanie) takich czynników przeciwdrobnoustrojowych, jak defensyny (b i c), fosfolipaza A2, lizozym i inne. TLR umożliwiają niszczenie mikroorganizmów przez fagocyty i optymalizację azotu.

Wydaje się, że TLR zlokalizowany na powierzchni komórek śródbłonka pośrednio zapewnia migrację leukocytów do środka ogniska, stymulując ekspresję cząsteczek adhezyjnych leukocytów – E-selektyny i ICAM-1.

Stymulacja TLR bezpośrednio prowadzi do zwiększonej produkcji interferonów (IFN) – zarówno komórek zrębowych, jak i krwiotwórczych, co jest istotne dla ochrony organizmu przed infekcjami wirusowymi i innymi bakteryjnymi. Co więcej, niedawno odkryto, że receptory TLR aktywując szereg cząsteczek (FADD, kaspaza 8, kinaza białkowa R (PKR)) lub stymulując ekspresję IFN-b/v, mogą indukować rozwój apoptozy, ważnego mechanizmu, który chroni komórki i rodzaje mikroorganizmów chorobotwórczych.

Wykazano, że receptory TLR odgrywają kluczową rolę w regulacji nabytego układu odpornościowego. Zatem zależna od TLR aktywacja profesjonalnych komórek dendrytycznych prezentujących antygen jest początkowym momentem w wielu ważnych procesach rozwoju odporności nabytej: aktywacji dojrzałych komórek T; przetwarzanie i prezentacja antygenów drobnoustrojów; zwiększona ekspresja cząsteczek kostymulujących (CD80, CD86), konieczna aktywacja naiwnych limfocytów T CD4+; supresja regulatorowych limfocytów T w celu dodatkowej produkcji IL-6. Jest również jasne, że aktywacja TLR jest ważna dla proliferacji i dojrzewania komórek B podczas infekcji.

Zatem TLR pełni w organizmie ważną rolę, gdyż bierze udział w rozwoju reakcji zapalnych (aktywacja odporności wrodzonej) w odpowiedzi na przedostanie się do organizmu różnych patogenów (pierwotniaki, grzyby, bakterie, wirusy iv). Co więcej, wraz z niedawną identyfikacją patogenów stojących za dodatkowym TLR, kluczowy punkt w tworzeniu kolejnej linii ochrony - odporności adaptacyjnej. Wykazano także, że receptory TLR biorą udział w prawidłowym funkcjonowaniu jelit, co spowodowane jest rozwojem chorób autoimmunologicznych (układowe zapalenie wątroby), zapaleniem stawów, miażdżycą itp. Pozostałe dowody wskazują, że TLR w tym przypadku aktywują odporność przeciwnowotworową lub być może stymulują postęp obrzęku.

3.1 Aktywność przeciwnowotworowa TLR

Wielu agonistów TLR jest obecnie testowanych klinicznie jako środki przeciwnowotworowe. Zatem naturalni (ssRNA) i syntetyczni (imikwimod) agoniści TLR7 i 8 wykazali wysoką aktywność w przewlekłej białaczce limfatycznej i raku skóry. Ligand TLR9 – CpG, który hamuje rozwój chłoniaków, obrzęki mózgu, szyi, skóry. Natomiast ligand TLR3 – poli(IC) ma działanie proapoptotyczne nie tylko na komórki pulchne, ale także na komórki cienkie (np. śródbłonek).

Wykazano, że agoniści TLR4 – LPS bakterii Gram-ujemnych i OK-432 (lek na paciorkowce grupy A) przy podawaniu wewnętrznym wykazują wysoką aktywność przeciwnowotworową. Jednakże leki podawane ogólnoustrojowo (LPS i OK432) w niewielkim stopniu blokują pulchny wzrost. Obecnie lek OK-432 przechodzi kolejny etap badań klinicznych, jako lek w leczeniu nowotworów jelita grubego i raka kończyn dolnych. Wykazano również, że OM-174, chemiczny agonista TLR2/4, po podaniu dożylnym z cyklofosfamidem hamuje postęp czerniaka i sprzyja przeżywaniu zwierząt doświadczalnych. Doświadczenia te ujawniły, że agoniści TLR2/4 indukują wydzielanie TNF-b i ekspresję indukowalnej syntazy NO. Najwyraźniej produkty NO indukują apoptozę w pulchnych komórkach, które są oporne na chemioterapię, a tym samym promują banalność życia myszy. Innym popularnym lekiem przeciwnowotworowym, który aktywuje reakcje komórek TLR (TLR2, 4, 9), jest BCG. Od ponad 30 lat lek ten jest z powodzeniem stosowany w leczeniu nabrzmiałych buraków.

Ogólnie rzecz biorąc, należy zauważyć, że różni agoniści TLR przechodzą obecnie badania kliniczne jako środki przeciwnowotworowe.

Jeden z głównych mechanizmów działania przeciwnowotworowego receptorów TLR polega na ich zdolności do stymulacji rozwoju typu odporności specyficznego dla nowotworu. Zatem aktywacja TLR:

1) stymuluje (bezpośrednio lub pośrednio) migrację łechtaczek NK, cytotoksycznych łechtaczek T i pomocników T typu I do tkanki obrzękowej, co powoduje lizę komórek obrzękowych za pomocą różnych mechanizmów efektorowych (wydzielanie foriny, granzymu , IFN-g i in.);

2) prowadzą do wydzielania IFN typu I (IFN-b, c). Innym skutecznym mechanizmem przeciwnowotworowego działania TLR jest możliwość zależnego od TLR przejścia makrofagów typu stymulującego nowotwór (M2) do typu M1 stymulującego nowotwór. Makrofagi typu M2 charakteryzują się ekspresją cytokin, takich jak TGF-β i IL-10, składników niezbędnych do naprawy i przebudowy tkanek. TGF stymuluje proliferację komórek nowotworowych, IL-10 bezpośrednio stymuluje rozwój odpowiedzi immunologicznej w mózgu Th2, blokując w ten sposób rozwój odporności komórkowej nowotworu. Na przykład makrofagi typu M1 wyrażają IL-1, -6, -12, TNF-b, IFN-g i stymulują rozwój typu odpornościowego komórek przeciwnowotworowych (Th1).

3.2 Aktywność TLR stymulująca wciąganie

Wydaje się, że najważniejszymi czynnikami stymulującymi rozwój nowotworów złośliwych są przewlekłe infekcje i stany zapalne. Rak okrężnicy może być powiązany z przewlekłym stanem zapalnym wywołanym przez patogen taki jak Helicobacter pylori, a przewlekłe zapalenie trawy często wiąże się z rozwojem raka okrężnicy. Ponadto wykazano, że stosowanie niesteroidowych leków przeciwzapalnych może zmniejszać ryzyko wystąpienia kilku rodzajów szkodliwych nowotworów.

TLR jest kluczowym elementem wrodzonego układu odpornościowego ludzi i zwierząt i bierze udział w rozwoju reakcji zapalnych, gdy komórki wchodzą w kontakt z różnymi patogenami. Obecnie aktywnie badana jest rola TLR w rozwoju i progresji nowotworów. Receptory TLR można uzyskać w procesie rozwoju i stymulacji tworzenia tkanki poprzez kilka mechanizmów.

Jednym z najważniejszych czynników pośredniczących w związku pomiędzy przewlekłym stanem zapalnym a obrzękiem jest NF-kB. Czynnik ten jest konstytutywnie mniej aktywny u 90% osób pulchnych, w tym w ostrej i przewlekłej białaczce szpikowej, raku przednim, szpiczaku mnogim, wątrobiaku złośliwym (rak wątroby) itp.

W związku z tym czynniki aktywujące NF-kB mogą odgrywać rolę w rozwoju i postępie obrzęku. Najwyraźniej interakcja patogenów z TLR na powierzchni komórki prowadzi do aktywacji NF-kB i ekspresji genów zależnych od NF-kB, co stanowi rolę TLR w stymulowaniu karcynogenezy. Aktywacja NF-kB prowadzi do zwiększonej produkcji cytokin IL-1, IL-2, IL-6, IL-10, TNF-b; migracja komórek układu odpornościowego do miejsca zapalenia w wyniku uwolnienia produkcji chemokin; „wspomaganie” przewlekłego spalania; zaawansowane produkty środków antyapoptotycznych itp. Wyznaczenie władzy może zapewnić przeżycie i postęp obrzęku ze względu na tłumienie apoptozy i cytotoksyczności, a także indukcję angiogenezy.

Obecnie wiadomo, że szybkość ruchów TLR u myszy z różnymi nowotworami oraz u myszy z nokautem genów TLR zmniejsza się częstotliwość powstawania indukowanych nowotworów. Ponadto zwiększona ekspresja TLR na powierzchni komórek motoryki przedniej lub głowy może stymulować ich proliferację.

Huang ta spivat. wykazali, że Listeria monocytogenes ma bezpośredni wpływ związany z jej zdolnością do aktywacji szlaków sygnalizacyjnych zależnych od TLR2 w komórkach raka jajnika. Co więcej, zależna od TLR2 aktywacja NF-kB, białka wywoływanego przez L. monocytogenes, zwiększała odporność komórek opuchniętych na leki stosowane w chemioterapii.

Związek między TLR2 a progresją obrzęku potwierdzono w innym niezależnym badaniu, w którym Karin i wsp. ujawniło kluczową rolę tego receptora w przerzutowym raku nogi. Okazało się, że u myszy z nokautem genu TLR2 przerzuty i progresja nowotworów są znacznie większe niż u myszy typu dzikiego. Kluczową rolę w progresji raka płuc odegrały komórki szpikowe, w których następuje ekspresja TNF-b w odpowiedzi na ich stymulację przez wersikan (proteoglikan macierzy postkomórkowej, ligand TLR2, swego rodzaju rabarbar). ruchy u pulchnych klientów różnego typu). Nasze badania wykazały również rolę TLR2 w postępie obrzęku. Zokrem okazało się, że zakażenie mykoplazmą (Mycoplasma arginini) lub dodanie składników strukturalnych (LAMB) tego organizmu do komórek wykazujących ekspresję TLR2 prowadzi do zahamowania w nich apoptozy, a także do wzmożenia pulchnego wzrostu mózgu in vivo . Pokazuje to, że receptory TLR mogą pośredniczyć w działaniu stymulującym nowotwór poprzez komórki mieloidalne.

Podobne dane uzyskano dla innego przedstawiciela rodziny TLR – TLR4. Ogólnoustrojowe (wewnętrzne) podawanie liganda receptora, LPS, stymulowało migrację komórek pulchnych (gruczolakorak sutka) i sprzyjało ich inwazyjności, a także stymulowało angiogenezę w komórkach puchowych. Podobne wyniki uzyskano w innym modelu – gruczolakoraku jelit: LPS zwiększał przeżywalność komórek nowotworowych, stymulując ich proliferację, a podany dootrzewnowo zwiększał przerzuty. Co więcej, Huang ta spivat. wykazali, że pulchne zwierzęta wyrażające TLR4 reagują znacznie agresywniej w czasie choroby (krótsze życie zwierząt) jest porównywalne z myszami linii izogenicznej, u których TLR4 jest inaktywowany przez specyficzny RNA. Dane pozwoliły nam założyć, że na progresję obrzęków TLR4-dodatnich mogą wpływać endogenne ligandy (białka szoku cieplnego, β-defensyny, endogenny LPS, który jest wydalany z jelit), co często pozwala przewidzieć sytuację z obrzękiem. działanie TLR2 i jego oblicze.

Jednakże dane ilustrujące działanie TLR promujące nowotwór nie są takie same dla TLR2 i 4. Wydaje się, że zwiększona ekspresja TLR5 i TLR9 na komórkach nabłonka szyjki macicy może być powiązana z progresją raka szyjki macicy. Wysoki poziom ekspresji TLR9 wykryto w klinicznych przypadkach raka płuc w liniach komórek pulchnych. W tych komórkach stymulacja TLR9 specyficznymi agonistami spowodowała zwiększoną produkcję cytokin towarzyszących nowotworowi. Na powierzchni komórek obrzęk przedniej części komórki jajowej również wykazuje TLR9. Traktowanie takich komórek oligodeoksynukleotydami CpG (ODN-CpG) lub bakteryjnym DNA służącym jako ligandy dla TLR9 spowodowało zwiększoną inwazję pulchnych komórek. Zwiększona inwazja komórek opuchniętych w wyniku aktywacji TLR9 może być nowym mechanizmem, w którym przewlekłe infekcje mogą stymulować wzrost komórek opuchniętych w gruczole przednim.

Jednak nie tylko różne czynniki zakaźne i ich składniki strukturalne mogą stymulować karcynogenezę poprzez interakcję z TLR. Najwyraźniej DAMP służą również jako ligandy dla TLR – białek komórkowych jądrowych i cytoplazmatycznych, które są odpowiedzialne za martwicę. Zainfekowane komórki DAMP można rozpoznać po różnych receptorach TLR na powierzchni komórek odpornościowych, a późniejsza aktywacja sygnałów TLR może prowadzić do tłumienia przeciwnowotworowego układu odpornościowego, jak lód, przed stymulacją postępu obrzęku.

Do cząsteczek, które mogą mieć potencjalne działanie stymulujące pulchność, należą: białka szoku cieplnego (HSP60, 70), ATP i kwas secynowy, rodzina białek modulujących Ca2+ (S100), białko HMGB1 i kwasy nukleinowe związane z lepszym rozwojem DNA -GB1. HMGB1, który jest uwalniany w wyniku uszkodzenia komórek, aktywuje układ odpornościowy poprzez interakcję z receptorami TLR. W hodowlach komórkowych wykazano, że białko HMGB1 stymuluje wzrost komórek czerniaka, raka gruczołu sutkowego, okrężnicy, tkanki podgłośniowej i gruczołu przedniego. Wykazano, że HMGB1 aktywuje TLR2 i TLR4 na komórkach nowotworowych i komórkach układu odpornościowego, w wyniku czego indukuje progresję nowotworu i przerzuty.

Wykazano, że w komórkach czerniaka występuje zwiększona ekspresja takich DAMP jak białka z rodziny S100, które stymulują wzrost samych komórek czerniaka oraz limfocytów krwi obwodowej, pełniąc rolę autokrynnego czynnika wzrostu obrzęku. Białko S100A4, pełniąc funkcję liganda dla TLR, stymuluje przerzuty komórek raka piersi, co zwiększa ekspresję i wskazuje na złe rokowanie. Niezależnie od interakcji S100A4 z przerzutami, białko to może ulegać ekspresji w makrofagach, limfocytach i fibroblastach. Ostatnie badania wykazały, że białka S100A8 i S100A9, które są wytwarzane przez tkankę pierwotną, aktywnie aktywują amyloid A (SAA) 3 w surowicy w tkankach płuc, tworząc w ten sposób mocz, w celu wytworzenia przerzutów do tkanki shi. SAA3 służy jako ligand dla TLR4 na komórkach śródbłonka i makrofagach. Aktywacja TLR4 ułatwia migrację pulchnych tkanek z jamy pierwotnej do tkanki legionu poprzez formowanie mikronacięć, które absorbuje wzrost pulchności. Zatem supresja szlaku sygnałowego S100-TLR4 może skutecznie zapobiegać rozwojowi przerzutów w płucach.

Na podstawie opisu efektu można stwierdzić, że produkcja TLR z jednej strony bierze bezpośrednio i pośrednio udział w postępie obrzęku, z drugiej strony zwiększa odporność komórek pulchnych na impulsy proapoptotyczne .

Prezentacje te pokazują, że masowe efekty TLR i ich ligandów sugerują mechanizm składania, który należy zbadać bardziej szczegółowo. Jednakże niezależnie od złożoności tego pożywienia, można dostrzec kilka kluczowych punktów wskazujących na pulchny efekt TLR:

1) oddziaływanie TLR z ciężkimi ligandami indukuje aktywację czynnika transkrypcyjnego NF-kB i w efekcie sprzyja wytwarzaniu różnych cytokin prozapalnych (IL-6, MCP-1, MIF, GROB i in.), a także pewna liczba w białkach antyapoptotycznych, wiążąc w ten sposób bezpośrednie lub pośrednie działanie pulchne;

2) Zależna od TLR aktywacja komórek mieloidalnych i ich progenitorów może być głównym czynnikiem powstawania przerzutów. Seria niezależnych badań wykazała, że ​​kluczową rolę w tworzeniu nisz przerzutowych odgrywają małe komórki migrujące ze szpiku kostnego (w odpowiedzi na stymulację endogenną) do tkanki. Wiadomo, że wytwarzane są endogenne (wersikan, fibronektyna itp.) i egzogenne (aktywność mikrobiologiczna) ligandy TLR, z jednej strony stymulujące komórki szpikowe i ich progenitory, a z drugiej strony, jeśli potencjał przerzutowy obrzęku jest większa, wówczas można uniknąć snu, zachowując dużą ostrożność w interakcjach pomiędzy zależną od TLR aktywacją komórek szpikowych a ich dalszym udziałem w przerzutach;

3) aktywacja TLR może stymulować angiogenezę poprzez czynniki antygenowe, takie jak IL-8, czynnik wzrostu śródbłonka naczyń (VEGF) i metaloproteinazy macierzy (MMP), a także wywierać adhezyjny i inwazyjny wpływ na pulchne komórki w celu zwiększenia penetracji naczyń.

Opublikowano na Аllbest.ru

...

Podobne dokumenty

Wzmacnia połączenie między układem odpornościowym i nerwowym organizmu. Receptory glutaminianu w układzie nerwowym mają swoje cele. Reakcje molekularne neuronu, które są aktywowane. Przyczyny i dziedziczenie neurotoksyczności receptorów NMDA. Interakcja żywych neuronów.

streszczenie, dodatek 26.05.2010


Cytokiny i ich receptory komórkowe. Fagocytoza jest ważnym elementem ochrony przeciwdrobnoustrojowej. Wybór mechanizmów efektorowych odporności komórkowej. Zmierz interakcje cytokin. Reakcje mające na celu redukcję komórek zakażonych wirusem w organizmie.

streszczenie, dodatek 28.09.2009


Charakterystyka dopaminy, jej właściwości i funkcje w organizmie człowieka; zapewnienie aktywności poznawczej. Klasyfikacja receptorów dopaminy: rodzaje, lokalizacja. Opis mechanizmów działania i skutków ubocznych różnych leków dopaminergicznych.

prezentacja, dodatek 15.06.2015


Rola niebezpiecznych komórek w regulacji homeostazy organizmu. Lokalizacja niebezpiecznych komórek i ich mediatorów. Wydzielanie mediatorów i ich funkcje. Główne typy niebezpiecznych komórek. Receptory i ligandy, działanie mediatorów. Losy niebezpiecznych komórek w procesach patologicznych.

prezentacja, dodatek 16.01.2014


Morfologicznie wykazać rozwój reakcji zapalnej organizmu na zakażenie gruźlicą.Kontynuacja reakcji enzymatycznych, których aktywność leży u podstaw stanu funkcjonalnego wszystkich organów prokuratury i całego organizmu. Rola komórek w zdrowej tkance.

streszczenie, dodatek 15.09.2010


Jenner jest twórcą koncepcji odporności. Niespecyficzne komórkowe i humoralne mechanizmy chemiczne. specyficzne układy odpornościowe. Narządy układu odpornościowego: grasica (grasica), torbielowaty móżdżek, węzły chłonne, tkanka limfatyczna śledziony.

streszczenie, dodatek 02.04.2010


Mowy wywołujące alergie. Reakcje immunologiczne organizmu. Tworzenie klonów specyficznych dla antygenu. Reakcja nadwrażliwości typu zaspokojonego. Stadium zmian patofizjologicznych. Podstawowe metody leczenia chorób alergicznych.

streszczenie, dodatek 10.07.2013


Ocena skuteczności i bezpieczeństwa leczenia nadciśnienia tętniczego u pacjentów stosujących inhibitory ACE, blokery receptora angiotensyny, leki moczopędne. Świadomość wyników leczenia lizynoprylem, losartanem, werapamilem, betaksololem, hipotiazydem.

streszczenie, dodatek 24.07.2014


Zdefiniowano definicję „endometriozy”. Mechanizm choroby obejmuje enzymy komórkowe, receptory hormonalne i mutacje genów. Etiologia, patogeneza, klasyfikacja i obraz kliniczny endometriozy narządów płciowych. Diagnostyka i leczenie chorób.

prezentacja, dodatek 23.09.2014


Zjawiska bioelektryczne w komórkach nerwowych. Charakterystyka receptorów, ich rodzaje i specyfika, pojęcia „neuroprzekaźnik”, „posłaniec”, budowa i mechanizm ich działania. Wlew środków farmakologicznych podczas leczenia chorób ośrodkowego układu nerwowego.

2.2. Rozpoznanie obcego w układzie odporności wrodzonej

in vivo na zwierzętach z nokautem genów TLR (w celu zapewnienia ochrony przed tymi i innymi patogenami). Miejsca wiązania TLR mogą wykazywać dużą zarodnikowość dla ligandów. Działki te mają strukturę przypominającą podkowę, której zewnętrzna część zbudowana jest z a-helis, a wewnętrzna część, wiążący ligand, zbudowana jest z p-kulek. Dane dotyczące specyficzności i lokalizacji ludzkich receptorów TLR przedstawiono schematycznie na ryc. 2.11.

Najczęściej TLR rozpoznają struktury zawierające lipidy, oligonukleotydy i węglowodany; najprawdopodobniej - białka (na przykład flagelina w TLR-5). Kompleks łatwo jest ustalić, gdy bakteryjny LPS zostanie rozpoznany przez receptor TLR-4 (ryc. 2.10). Aby rozpoznać LPS, najpierw musimy wydalić bakterię ze ściany komórkowej, po czym tworzy ona kompleks z czynnikiem surowicy LBP (kompleks wiążący LPS). LBP może sporidizować do cząsteczki błonowej CD14, co zapewnia interakcję z nią kompleksu LPS-LBP. Następnie kompleks ten (związany już z błoną poprzez lipid A, który trafia do magazynu LPS), wiąże się z wewnętrzną (hydrofobową) powierzchnią cząsteczki MD2, jej zewnętrzną powierzchnią, która oddziałuje z wewnętrzną powierzchnią „podkowy” TLR -4 (co właściwie jest TLR -4 rozpoznaje nie LPS, ale MD2). Odkryto podobną rolę cząsteczek koreceptorów w rozpoznawaniu wzorców TLR-2; W tym przypadku cząsteczki CD14, CD36 i integryna avP3 (witronektyna) działają jako koreceptory. Oczywiście rozpoznanie wzorców TLR wymaga udziału cząsteczek dodatkowych.
TLR rozpoznają kwasy nukleinowe i struktury podobne do nukleotydów, co jest ważne dla rozpoznawania zarówno wirusów, jak i bakterii. Zatem TLR-3 rozpoznaje dwuniciowy RNA charakterystyczny dla większości wirusów, a TLR-9 rozpoznaje fragmenty DNA wzbogacone w niemetylowane sekwencje CpG (cytydyna-fosforan-guanozyna), charakterystyczne dla bakteryjnego DNA. TLR-7 i TLR-8 mogą oddziaływać ze związkami imidazocholiny i guanozynopodobnymi (na przykład, gdy TLR-7 z nimi wchodzi w interakcję, uruchamiana jest obrona przeciwwirusowa). Strukturalne podobieństwo tych białek do wirusowego DNA wynika z faktu, że TLR-7 i TLR-8 biorą udział w rozpoznawaniu jednoniciowego wirusowego RNA. Wszystkie 4 typy TLR rozpoznające kwasy nukleinowe (TLR-3, TLR-7, TLR-8, TLR-9) są zlokalizowane w środku komórki (ryc. 2.11). Ze względu na specyfikę struktury warstwy transbłonowej, te receptory TLR są obecne głównie na błonie retikulum endoplazmatycznego, a nie na plazmalemie. Podczas endocytozy materiału zawierającego PAMP, receptory TLR są mobilizowane z błony siateczki do błony fagolizosomu, gdzie rozpoznają komórki i przekazują sygnał w całej komórce. Lokalizacja TLR-3, TLR-7, TLR-8, TLR-9 nie na powierzchni komórki, ale w fagolizosomie, chroni rozpoznanie uwodnionych kwasów nukleinowych, co zagraża rozwojowi patologii autoimmunologicznej. Jakikolwiek DNA lub RNA zostaje utracony w fagolizosomie, co powoduje apoptozę. Ponadto kwasy nukleinowe przeprowadzane w wirusach i bakteriach stają się dostępne dla receptorów na fagolizosomach, umożliwiając niszczenie patogenów. Ekspresję TLR na komórkach odporności wrodzonej opisano w tabeli. 2.10.
W wyniku rozpoznania ligandów TLR generowany jest sygnał aktywacji. Kluczową rolę odgrywa wewnętrzna domena TIR komórki, z którą powiązane są cząsteczki adaptorowe. Proces sygnalizacji TLR zostanie omówiony w kontekście aktywacji komórek odporności wrodzonej (rozdział 2.2.4).
Tabela 2.10. Ekspresja receptorów Toll-podobnych na komórkach układu odpornościowego

Chwytnik	Tipi Klitin									Napływ aktywacji do ekspresji
	Monocyty i makrofagi	Neutrofile	-0 Zanim I 8-8- O I I zi O 0	Gładkie uda	Dendrytyczny Klitini	Naturalny Kelery	I I N F zanim « 1 CQ	I I N F zanim «	Naturalny regulacyjne T-clintini
TLR-1	+	+	+	+	+ (M, P)	+	+	+	+	Konstytutywna ekspresja na wszystkich komórkach
TLR-2	++	++		+	++(M)				+
TLR-3	++/+*	-	-	-	++(M)	++	-	+	-	Nie ma siły
TLR-4	++	++	+	+	++(M)	+			+	Wzmocnienie pod napływem wzorców molekularnych i cytokin związanych z patogenami
TLR-5	++	+	-	-	+ (M)	+	+	-	+	Nie ma siły
TLR-6	++	+	-	+	+(M, P)	+	+	++	+	Te same
TLR-7	+	+	+	-	+ (P)	-	-	+	+	Wzmocniony napływem cytokin
TLR-8	++	+	-	-	+ (M)	+	+	-	+	Umocnienie pod napływem IFNy
TLR-9	+	+	+	-	+ (P)	+	-	+	-	Te same
TLR-10	+	+	+	-	+	-	-	+	-	Nie ma siły

M - mieloidalny;
P – plazmocytoid;
* - silna ekspresja na monocytach, słaba ekspresja na makrofagach.

W tym przeglądowym artykule omówiono podstawowe pojęcia dotyczące wrodzonych receptorów odporności związanych z błoną - receptorów Toll-podobnych, główne metody ich znaczącej ekspresji, które zostaną określone w badaniach klinicznych, a także zabierz wyniki z ich pomocy. Perspektywy przyszłych badań opierają się na nowych informacjach na temat funkcjonowania systemuTLRwymagana jest także wszechstronna ocena każdego z nich. Pozwoli to wyjaśnić i zlokalizować defekty molekularne wrodzonego układu odpornościowego, a także ocenić ich rolę w patogenezie szerokiego zakresu chorób.

І Indywidualna odporność organizmu na infekcję zależy od patogeniczności mikroorganizmów, czynników chorobowych i stanu układu odpornościowego. Ochrona na poziomie lokalnym po zakażeniu następuje bezpośrednio przed typową reakcją zapłonu, która ma bezpośrednio na celu rozpoznanie i zniszczenie patogenu i jego składników. Limfocyty T, które biorą udział w adaptacyjnej odpowiedzi odpornościowej, rozpoznają patogeny, receptory wikorystyczne i o wysokim powinowactwie. Jednak rozwój odporności nabytej musi trwać długo, co wiąże się z aktywacją, proliferacją limfocytów i syntezą przez nie białek: cytokin i immunoglobulin. Większy rozwój reakcji immunologicznych zapewnia odpowiedź immunologiczna wrodzona, która rozpoznaje patogeny za pomocą specjalnych receptorów o szerokiej swoistości, niższych od receptorów limfocytowych. Receptory te rozpoznają struktury molekularne ukryte dla całych grup chorób zakaźnych, przede wszystkim nazywane są receptorami Thin-like (TLR). Receptory TLR oddziałują ze strukturami molekularnymi, których nie ma u ludzi, ale nie występują u patogenów. TLR jest szeroko rozpowszechniony w komórkach makroorganizmu. Indukują aktywację i ekspresję specyficznych genów, których ekspresja kontroluje mechanizmy zapewniające zniszczenie promowanych patogenów. Aktywacja poprzez TLR powoduje szeroki zakres reakcji biologicznych – od indukcji syntezy cytokin prozapalnych i interferonów (które zapewniają realizację wrodzonej odpowiedzi immunologicznej) po cząsteczki ekspresyjne i kostymulujące, które promują aktywację limfocytów T i stymulują rozwój nabytego typu odporności.

Szeroka gama ligandów TLR i obecność tych receptorów na wielu komórkach przyczynia się do nabywania receptorów TLR przed patogenezą wielu chorób. Defekty w układzie TLR, takie jak upośledzone rozpoznawanie ligandów, ekspresja TLR, przekazywanie sygnału, proliferacja cząsteczek efektorowych, a także polimorfizm genów TLR mogą prowadzić do rozwoju ciężkich infekcji i chorób (posocznica, zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych), chorób autoimmunologicznych, miażdżycy , patologia alergii. Defekty w cząsteczkach zaangażowanych w przekazywanie sygnału przez receptory TLR leżą u podstaw zwiększonej podatności na infekcje. Zatem dzieci z mutacją w genie kodującym kinazę IRAK-4 od najmłodszych lat cierpią na ważne infekcje patogenne wywołane przez mikroorganizmy Gram-dodatnie. Jednocześnie skrajna aktywacja kaskady sygnalizacyjnej TLR wiąże się z rozwojem posocznicy, chorób zapalnych jelit i może prowadzić do zniszczenia tkanek. Rośnie liczba wykrytych więzadeł o różnych patologiach spowodowanych uszkodzeniem układu TLR. W związku z tym istnieje zapotrzebowanie na adekwatne i wiarygodne metody oceny elementów układu TLR w celu identyfikacji stanów niedoborów odporności związanych z upośledzoną aktywnością funkcjonalną TLR, które można opracować dla umysłów standardowego laboratorium klinicznego.

Znaczenie ekspresjiTLR. Ekspresję TLR na powierzchni komórek najczęściej wykrywa się za pomocą dodatkowej metody immunofluorescencyjnej. Zasada tej metody polega na tym, że w nowym fluorescencyjnym berberysie przeciwciała monoklonalne (mAb) przeciwko markerom CD tego typu komórek są jednocześnie znakowane innym fluorochromowym mAb na TLR, który jest testowany („kolejna” metoda nr 1) ). Jako przykład opiszemy pokrótce metodę identyfikacji TLR2 i TLR4 na monocytach przy użyciu zawiesiny komórek jednojądrzastych obserwowanej we krwi obwodowej, indukowanej w robocie.

Aby określić ekspresję TLR2 i TLR4 na monocytach krwi obwodowej, jak widać na gradiencie Ficoll-urografina, komórki jednojądrzaste inkubowano z przeciwciałami znakowanymi FITC do CD14+, przeciwciałami znakowanymi PE do TLR2 i CD 14 + TLR4, TLR2 i Ekspresję TLR4 przeprowadzono metodą cytometrii przepływowej. Oceniliśmy liczbę monocytów (CD 14 + -klityna) niosących na swojej powierzchni TLR2 i TLR4 oraz średnią intensywność fluorescencji (CFI), której wartość wyrażono w jednostkach fluorescencji.

Cytometria laserowa przepływowa Przygotowanie próbek do cytometrii przepływowej powinno nastąpić niezwłocznie: komórki krwi obwodowej, które usuwają jądro, są widoczne poprzez sedymentację erytrocytów za pomocą 3% rozpuszczonej żelatyny. Przed dodaniem przeciwciał zawiesinę komórek w celu monitorowania ekspresji wewnętrznych TLR komórek traktuje się najpierw utrwalającym środkiem permeabilizującym. Ekspresja powierzchniowych TLR nie wymaga przetwarzania przez te podziały; fragmenty TLR1, 2, 4, 6 i 10 są ważne związane z błoną. Leczenie wtórnymi przeciwciałami przeciw myszom, oznaczonymi FITS lub PE, musi być również zgodne z międzynarodowymi standardami. Jako kontrolę izotypową wimirów cytometrycznych należy przetestować frakcję IgG z nieimmunizowanych obiektów docelowych. Końcowe stężenie do analizy ustawiono na 2x106 komórek/ml. Cytometrię lasera przepływowego przeprowadza się przy użyciu lasera argonowego przy długości fali 488 nm. Cytogramy śledzonej zawiesiny komórek są generowane w oparciu o rejestrowane parametry, rozpraszanie światła w małych komórkach (FSC) i rozpraszanie światła w dużych komórkach (SSC) w trybie wykresu punktowego. Analizę intensywności fluorescencji i zasięgu komórek fluorescencyjnych przeprowadza się na linii zielonej (FITS) FL1 (530 nm) i linii pomarańczowej (PE) FL2 (585 nm). Komórki analizuje się przy użyciu lasera argonowego przy natężeniu przepływu 5000 komórek/s. Średnią intensywność fluorescencji komórek wyraża się w jednostkach fluorescencji (UFU).

Ekspresja genów mRNATLR Wyniki określane są metodą PLR w trybie „czasu rzeczywistego” (RT) w połączeniu z odwrotną transkrypcją przy użyciu szeregu specyficznych starterów. Przykładowo ekspresję genów TLR2 i TLR4 można osiągnąć stosując następujące startery: TLR-2 – TLR2-F1-CCTTCACTACTAGGAGAGAGAGGC, TLR2-R1 – TGAAACG-GTGGCACAGGAC; do TLR-4 - TLR4TF6 - GAAGGGGT-GCCTCCTTTTCAGC, TLR4-R6 - GCCTGAGCAGGGTCT-TSTCSA. Poziomy ekspresji mRNA TLR kontrolują (standaryzują) gen GAPTAH (GAPDH-F1 – TGC-MTCCTGCACCACCAACT; GAPDH-F2 – YGCCTGCTTCAC-CACCTC) pod kątem poziomu podobnej ekspresji tego genu w tkankach układu rozrodczego człowieka.

Obecnie przy użyciu tych metod przeprowadzono w galusie dziesiątki badań nad rozwojem receptorów Toll-podobnych w różnych chorobach człowieka. Jako przykład można posłużyć się robotem „Ekspresja receptorów Toll-like w polipach nosa i na komórkach krwi obwodowej u pacjentów z polipowym zapaleniem nosa i zatok”, w którym przeprowadzono nową analizę ekspresji receptorów TLR i NOD-2 w tkankach i polipy nosa oraz komórki krwi obwodowej oraz oceniano rolę tych substancji chemicznych jako wskaźników w patogenezie polipowatego zapalenia nosa i zatok.

Naukowcy wykazali, że w wyniku badań nad rozwojem receptorów TLR i NOD najbardziej patogenetycznie istotny jest znaczny wzrost ekspresji receptorów TLR4 i TLR5 na granulocytach, monocytach i limfocytach obwodowych krew osobista na komórkach nacieku zapłonowego w polipach nosa, a także w tych komórkach. Wydaje się, że aktywacja wrodzonego układu odpornościowego i zwiększona ekspresja TLR nie powodują żadnych skutków patofizjologicznych. Podczas immunopatogenezy polipowatego zapalenia nosa i zatok, infekcje bakteryjne i grzybicze odgrywają rolę wyzwalacza immunologicznego zapalenia in situ, najbardziej znaczące konsekwencje leżą w nadprodukcji cytokin prozapalnych i x Emokinowa, co jest głównym czynnikiem powstawania zapłonu komórkowego infiltrować. Charakterystyczne jest także nasilenie funkcji fagocytujących i prezentujących antygen komórek szeregu makrofagi-monocyty, czemu towarzyszy nadprodukcja mediatorów stanu zapalnego. W rezultacie dochodzi do aktywacji nabytego układu odpornościowego, co zapewnia rozwój in situ typu limfocytarnego specyficznego dla antygenu krtani.

Autorzy opracowali szczegółowe podejście do oceny elementów układu TLR u osób zdrowych, u pacjentów z immunopatologią (częstym zmiennym niedoborem immunologicznym – CVID) oraz w ostrych procesach patologicznych niezakażenia, jego genezy w kontekście ostrego zapalenia mięśnia sercowego zawał – GIM.

Aktywność funkcjonalną TLR oceniano poprzez zapłodnienie FNP-α przez monocyty ludzkiej krwi obwodowej typu liganda TLR. FNP-α jest jedną z głównych cytokin efektorowych, która zapewnia rozwój reakcji zapalnej. W zaproponowanej metodzie autorzy zbadali komórki jednojądrzaste, a nie pełną krew, fragmenty niepowiązanych inhibitorów TLR, cytokin przenoszących osocze, które mogą negatywnie wpływać na ocenę funkcji TLR.

W rezultacie badania wykazały, że komórki jednojądrzaste pacjentów z CVID charakteryzują się niskim wzrostem poziomu FNP-α w typie ligandów TLR2, 6, 4 i 5 in vitro. Może to powodować osłabienie funkcji chemicznych organizmu u tych pacjentów podczas powtarzających się infekcji in vivo. W rozwoju ostrych stanów patologicznych, takich jak GIM, ważną rolę odgrywają komórki układu odporności wrodzonej – neutrofile, makrofagi, a także cytokiny prozapalne. Jego ekspresję można indukować poprzez aktywację komórek poprzez wrodzone receptory odpornościowe. Po wszczepieniu spontanicznej i indukowanej ligandem TLR produkcji FNP-α przez komórki jednojądrzaste u pacjentów poddawanych GIM, autorzy wykazali, że dodatkowy wzrost produkcji FNP-α przez komórki jednojądrzaste może służyć jako prognostyczna oznaka niekorzystnego wyniku leczenia. W przypadku pacjentów reagujących na ligand TLR LPS i zymozę po rozwoju GIM korelowano z indukowanymi wibracjami FNP-α w pierwszym przypadku choroby.

W pracy zbadano interakcję rang mRNA TLR2 i TLR4 ze zmianami w profilu immunoglobulin układu moczowo-płciowego u kobiet chorych na chlamydię moczowo-płciową.

Autorzy ustalili związek profilu immunoglobulin z ekspresją mRNA receptorów odporności wrodzonej w komórkach kanału szyjki macicy (CC) w patogenezie chlamydii układu moczowo-płciowego (UCC). Wykazano, że poziom IgG, IgM, IgA, slgA, a także ekspresja receptorów TLR2 i TLR4 wskazują i charakteryzują przeżycie procesu zakaźnego, nasilenie objawów klinicznych i wynik choroby.

Zwiększenie poziomów ekspresji TLR2 i TLR4 związane ze wzmocnieniem lokalnej syntezy slgA może prowadzić do rozwoju ważnego lokalnego stanu zapalnego i korzystnego wyniku choroby. Zdaniem badaczy wskaźniki te można wykorzystać jako dodatkowe kryteria oceny postaci procesu chlamydialnego i ciężkości jego progresji.

Robot badał rolę receptorów Toll-podobnych w rozwoju immunologicznego stanu zapalnego w skórze pacjentów chorych na łuszczycę. Badanie liczby receptorów Toll-like TLR2, TLR4 i TLR9 w strukturach skóry przeprowadzono metodą immunohistochemiczną z wykorzystaniem różnych przeciwciał monoklonalnych. Autorzy ustalili zwiększoną ekspresję TLR2 i TLR4 na komórkach naskórka i komórkach śródbłonka pacjentów chorych na łuszczycę, w związku z ekspresją TLR9. Według autorów odpowiada to rozwojowi przewlekłych reakcji zapalnych.

W pracy Stwierdzono związek polimorfizmu w genach TLR2 i TLR9 z częstymi przyczynami infekcji i infekcji wewnątrzmacicznych. Markery polimorficzne w genie TLR2 identyfikowano w materiale klinicznym za pomocą dodatkowego PLR, natomiast markery polimorficzne w genie TLR9 identyfikowano za pomocą dodatkowego PLR w trybie czasu rzeczywistego. Wykazano, że allel Arg polimorficznego markera Arg753Gln genu TLR2 jest powiązany z infekcją wewnątrzmaciczną. Inny allel A polimorficznego markera A2848G genu TLR9 jest powiązany z terminologią dotyczącą infekcji układu moczowo-płciowego.

W pracy H podsumowano materiały dotyczące roli receptorów Toll-podobnych (TLR) i ich ligandów w patogenezie miażdżycy. Lipopolisacharydy bakteryjne (LPS), które mogą oddziaływać z TLR4, mogą indukować powstawanie zmian miażdżycowych w stacji tętniczej. Ryzyko rozwoju miażdżycy zmniejsza się w przypadku mutacji TLR4. Inne ligandy drobnoustrojów i białka szoku cieplnego mogą również brać udział w wywoływaniu miażdżycy. Zaproponowano jedną teorię aterogenezy, zgodnie z którą indukcja i progresja aterogenezy jest efektem ubocznym oddziaływania egzogennych i endogennych ligandów z TLR.

Robot badał aktywność funkcjonalną komórek jednojądrzastych krwi obwodowej za pośrednictwem TLR u dzieci z różnymi postaciami neutropenii. Autorzy stwierdzili, że ligandy TLR2, TLR4, TLR5 miały niewielką aktywność stymulującą wytwarzanie FNP przez MNC dzieci z neutropenią wrodzoną i nie wpływały na MNC dzieci z neutropenią immunologiczną. U dzieci z immunologiczną postacią neutropenii wykazano znaczny wzrost stymulowanej produkcji IFN-α w odpowiedzi na ligandy TLR3, TLR8 i TLR9. Autorzy zauważają, że większe znaczenie dla rozwoju i przeżycia infekcji u tych pacjentów mogą mieć ustalenia dotyczące zmian aktywności funkcjonalnej MNC za pośrednictwem TLR u dzieci z różnymi postaciami neutropenii.

Robot mierzył ekspresję TLR w śledzionie i węzłach chłonnych myszy, stosując metody immunizacji błony śluzowej. Immunizację myszy wieloskładnikową szczepionką Imunovac przeprowadzono drogą śluzówkową i podskórną. Na podstawie tych danych autorzy uważają, że wysokiego poziomu uczulenia na różnych poziomach podawania tych leków należy spodziewać się już na etapie interakcji ligandu z TLR.

Robot badał znaczenie ekspresji TLR dla doboru farmakologicznej korekcji patologii szyjki macicy i endometrium. Po iniekcji jąderka nasiennego sodem odnotowano wzrost częstości występowania komórek wykazujących ekspresję typów TLR4 i TLR9 w badanym materiale, a także spadek liczby wirusa brodawczaka ludzkiego iku kłączy wysokoonkogennych.

Robot wstrzyknął inhibitor cyklooksygenazy, lornoksykam, aby pośredniczyć w syntezie TLR cytokin prozapalnych i prozapalnych przez komórki jednojądrzaste krwi obwodowej zdrowych dawców i pacjentów z ostrym zapaleniem trzustki. Wykazano, że lornoksydy hamują za pośrednictwem TLR syntezę zarówno cytokin prozapalnych (IL-1, 6, 8, 12, FNP-α), jak i cytokiny prozapalnej IL-10. Podawanie lornoksykamu pacjentom z ostrym zapaleniem trzustki w kobaltowym stadium choroby prowadziło do zmniejszenia wytwarzania FNP przez komórki jednojądrzaste krwi obwodowej u gatunków LPS-dodatnich, a w konsekwencji do zmniejszenia funkcji efektorowych TLR4 i TLR1/ 2 w dolegliwościach tsikh, które zmieniają rozwój złożoności rizik.

Znaczenie ekspresji TLR i jej aktywności funkcjonalnej jest wstępnym krokiem w ocenie układu TLR u człowieka. Aby uzyskać nowe informacje na temat funkcjonowania systemu TLR, konieczna jest kompleksowa ocena jego pasów. Podobne podejście zostało już wcześniej sformułowane w celu oceny stanu odporności w oparciu o zasadę patogenetyczną: miało ono na celu ocenę różnych etapów funkcjonowania układu odpornościowego. Dalsze kroki w ocenie systemu TLR muszą obejmować analizę wszystkich pozostałych składników systemu TLR: ocenę ekspresji cząsteczek biorących udział w przekazywaniu sygnału, czynników transkrypcyjnych itp. Pozwoli to wyjaśnić i zlokalizować defekty molekularne wrodzonego układu odpornościowego, a także ocenić ich rolę w patogenezie choroby.

W tym przypadku możliwe jest przeprowadzenie badań eksperymentalnych na różnych myszach transgenicznych i z nokautem genów, z różnymi defektami genów, w celu lepszego określenia napływu ekspresji i polimorfizmu TLR na wpływ. Jest wiele przypadków, w tym chorób zakaźnych . Jest taka śpiewająca szlachta izhchennya іndivniynny, vicoristovy Yakiki jest specjalnie przystosowany do skóry TLR, wysusza nasze Rozshiriti na temat reakcji na zorganizowany tlr.

Literatura

1. Simbirtsev A.S. Białka płatne: specyficzne receptory odporności nieswoistej. Immunologia 2005; 26 (6) : 368-376.
2. Werling D., Jungi T.W. TLR charakteryzuje odpowiedź immunologiczną. Weterynarz. Immunol. Immunopatol. 2003; 91 : 1-12
3. Rakoff-Nahoum S., Paglino J., Eslami-Varzaneh F. i in. Dowody na temat mikroflory jelitowej w TLR są niezbędne dla homeostazy jelitowej. Komórka 2004; 118 : 229-241.
4. Zarember K., Godowski P. Ekspresja tkankowa ludzkich receptorów Toll-podobnych i zróżnicowana regulacja mRNA receptorów Toll-podobnych w leukocytach w odpowiedzi na drobnoustroje, ich produkty i cytokiny. J. Immunologia 2002; 168 :554-561.
5. Harter L., Mica L., Stocker R. i in. Szok, 2004, 5 : 403-409.
6. Li Liwu Curr. Cele leków – stan zapalny. Alergia, 2004, 3 : 81-86.
7. Vandenbulcke L., Bachert C., Cauwenberge P.V. w. Wewnętrzne Łuk. Immunol. Alergia, 2006, 139 : 159-165.
8. Picard C., Puel A., Bonnet M. i in. Nauka, 2003, 299 : 2076-2079.
9. L.V.Kovalchuk, M.V.Khoreeva i in. Wrodzone receptory odpornościowe: podejścia do klinicznej i funkcjonalnej oceny ludzkiego TLR. Immunopatologia i immunologia kliniczna 2008, 223-227.
10. M.Z.Saidov, Kh.Sh.Davudov i in. Ekspresja TLR w polipach nosa i komórkach krwi obwodowej u pacjentów z polipowym zapaleniem nosa i zatok. Immunologia, 2008, 5 : 272-278.
11. V.A. Aleshkin, A.V. Karaulov i in. Związek mRNA TLR2 i TLR4 ze zmianami w profilu immunoglobulin układu moczowo-płciowego w chlamydii układu moczowo-płciowego u kobiet.
12. Khaitov R.M., Pashchenkov M.V., Pinegin B.V. Biologia receptorów natywnego układu odpornościowego. Fizjol. ta patol. Układy odpornościowe, 2008, 6: 3-28.
13. Pitzurra L., Bellocchio S., Nocentini A. i in. Antyfunkcjonalna reaktywność immunologiczna u kobiet z polipowatością. Infekować. I Immun., 2004, 12 : 7275-7281.
14. Wang J., Matsukura S., Watanabe S. i in. Wzmocnienie receptorów TLR w układzie odpornościowym polipów łojowych komórek nabłonkowych. Clin. Immunol., 2007, 3 : 345-352.
15. Huvenne W., van Bruaene N., Zhang N. i in. Przewlekłe zapalenie zatok przynosowych bez polipów: jaka jest różnica? Aktualny Alergia Astma Rep., 2009, 3: 213-220.
16. Khaitov R.M., Pinegin B.V., Pashchenkov M.V. Znaczenie aktywności funkcjonalnej receptorów Toll-podobnych i innych receptorów natywnego układu odpornościowego w fizjologii jest niejasne. Rosyjski Dziennik Fizjologiczny, 2007, 5: 505-520.
17. Miedżitow R. Rozpoznawanie mikroorganizmów i aktywacja odpowiedzi immunologicznej. Natura, 2007, 18: 819-826.
18. Uematsu S., Akira S. TLR i odporność wrodzona. J. Mol. Med. 2006, 84: 712-725.
19. Kowalczuk L.V., Czerediew O.M. Aktualne problemy w ocenie układu odpornościowego człowieka Immunologia, 1990, 3 : 4-7.
20. Katunin O.R., Rezaikina O.V., Kolikhanova O.I. „Rola receptorów rozpoznawanych w inicjacji zapalenia immunologicznego w skórze pacjentów chorych na łuszczycę.” Biuletyn Dermatologii i Wenerologii, 2010, 5 : 84-91.
21. Gankovska O.A. „Badanie związku markerów polimorficznych genów TLR2 i TLR9 z zakażeniami przedporodowymi i wewnątrzmacicznymi”. Immunologia medyczna, 2010, 1-2: 87-94.
22. Glintsburg A.L., Likhodid V.G., Bondarenko V.M. „Czynniki egzogenne i endogenne w patogenezie miażdżycy. Receptorowa teoria miażdżycy. Rosyjski Dziennik Kardiologiczny 2010, 2 : 92-96.
23. Mamedova E.A., Kovalchuk L.V., Finogeneva N.A., Polovtseva T.V., Grachova L.A., Goldireva N.G., Khoreva M.V., Fetisova L.Ya., Nikonov A.WITH. W czynności funkcjonalnej komórek jednojądrzastych u dzieci z neutropenią pośredniczy TLR. Mikrobiologia, epidemiologia i immunobiologia, 2010, 2 : 64-68
24. Akhmatova N.K., Egorova N.B., Achmatow E.A., Kurbatova E.A., Semenova I.B., Chortov I.V., Semenov B.F., Zverev V.V. Ekspresja TLR w śledzionie i węzłach chłonnych podczas metod immunizacji błony śluzowej. Mikrobiologia, epidemiologia i immunobiologia, 2010, 1 : 50-54.
25. Proshin S.M., Glushakov R.I., Shabanov P.D., Saikovska L.A., Semenova I.V., Tapilska N.I. Znaczenie ekspresji TLR w wyborze farmakologicznej korekcji patologii szyjki macicy i endometrium. Transplantologia i inżynieria tkankowa, 2011, 6 (1): 91-97.
26. Kovalchuk L.V., Khoreva M.V., Nikonova A.S., Grechenko V.V., Agapov M.A., Indrakov V.A., Leonenko I.V., Gorsky V.A., Grachova L.A. Wpływ inhibitora cyklooksygenazy na stan funkcjonalny komórek jednojądrzastych wyrażających TLR. Mikrobiologia, epidemiologia i immunobiologia, 2010, 1 :45-50.

Cabir uszny kezinde Toll-tarizdi receptorlardi expressiyasin zertteu

5. Czynniki humoralne odporności wrodzonej (białka układu dopełniacza, białka ostrej fazy, białka szoku cieplnego, cytokiny, peptydy przeciwdrobnoustrojowe itp.)

6. Sieć cytokin. Klasyfikacja i funkcja cytokin.

7. Receptory endocytarne, sygnalizacyjne i wtórne odporności wrodzonej.

8. Receptory wydzielnicze natywnego układu odpornościowego.

9. System uzupełniający

10. Rola białek w szoku cieplnym i fazie ostrej.

11. Charakterystyka peptydów przeciwdrobnoustrojowych i ich producentów.

12. Interferoni, przyroda. Metody usuwania i stagnacji.

13. Rola do. I. Mechnikov ma sformułowane przekonanie o odporności. Niespecyficzni urzędnicy chronią ciało.

14. Komórkowe czynniki odporności wrodzonej (makrofagi, neutrofile, komórki naturalne, komórki dendrytyczne, zagrożenia komórkowe, bazofile itp.).

15. Fagocytoza (etapy fagocytozy, kwaśny wibuk itp.)

16. Funkcje naturalnych uzdrowicieli.

17. Receptory odporności wrodzonej błonowej i cytozolowej (tlr, nlr, rig). Dział Odcinek 7.

18. Klasyfikacja i charakterystyka komórek dendrytycznych.

21. Antygeny drobnoustrojów i komórek ludzkich (cd, mhc). Gapteni

22. Charakterystyka limfocytów Th1, Th2, Th17 i Treg.

23. Komórki immunokompetentne; limfocyty T, komórki prezentujące antygen.

25. Prezentacja antygenowi. Współpraca, główne etapy różnicowania limfocytów.

26. Formy typu odpornościowego. Regulacja układu odpornościowego.

27) Teorie odporności. Genetyka powstawania receptorów komórek T i B.

28) Tolerancja immunologiczna, mechanizmy

29) Komórkowa linia odpornościowa (linia odporności cytotoksycznej i zapalnej, rola cytokin, komórek pomocniczych t i makrofagów)

30) Humoralny układ odpornościowy (rola cytokin, limfocytów Th-2 i limfocytów B).

31) Przeciwciała. Klasy, budowa i funkcje immunoglobulin.

32) Siła antygenowa immunoglobulin, izotypy, alotypy, ideotypy. Coraz więcej przeciwciał.

33) Przeciwciała monoklonalne. Usunięcie (technologia hybrydowa) i stagnacja.

34) Genetyka przeciwciał.

35) Pamięć immunologiczna. Pierwszy jest pierwszym, a drugi drugim.

36) Mechanizmy odporności przeciwinfekcyjnej (przeciwbakteryjnej i przeciwwirusowej).

37) Mechanizm odporności przeciwrobaczej, przeciwnowotworowej i transplantacyjnej.

38) Nadwrażliwość typu niegejowskiego. Fur-mi vinique, znaczenie kliniczne.

39) Wstrząs anafilaktyczny i choroba. Powodować poczucie winy. Mechanizm. Jestem z wyprzedzeniem. Immunoterapia swoista dla alergii.

40. Mechanizm nadwrażliwości typu wzmocnionego. Wartości kliniczne i diagnostyczne

44. Ocena stanu odporności: główne wskaźniki i metody ich oceny.

45. Mechanizmy rozwoju reakcji autoimmunologicznych.

46. ​​​​Bardziej praktyczne jest badanie reakcji serologicznych.

47. Reakcje immunologiczne w diagnostyce chorób zakaźnych i niezakaźnych.

50. Bierna reakcja hemaglutynacji. składniki. Zastosuvannya.

51. Reakcja koaglutynacji. Mechanizm, komponenty. Zastosuvannya.

53. Reakcja strącania

54. Reakcje z różnymi znakowanymi przeciwciałami lub antygenami

55. Reakcja dopełniacza

56. Reakcja neutralizacji

57. Reakcja immunofluorescencyjna (rif, metoda Koonsa)

58. Metoda i analiza immunoenzymów

59. Immunologiczna mikroskopia elektronowa

60. Cytometria przepływowa

61. Reakcje serologiczne wykorzystywane w diagnostyce infekcji wirusowych.

62. Diagnostyka. Otrimannya, zastosuvannya.

63. Przeciwciała monoklonalne. Otrimannya, zastosuvannya.

64 Metody przygotowania i peklowania kleistych, zaadsorbowanych sierot.

65 Szczepionki

4.2.5.1. Surowica immunologiczna i immunoglobuliny

6. Sieć cytokin. Klasyfikacja i funkcja cytokin.

Cytokiny to grupa małych peptydowych mediatorów komórkowych, które są produkowane przez różne komórki organizmu i odgrywają ważną rolę w funkcjonowaniu procesów fizjologicznych w warunkach normalnych i patologicznych.

Siła cytokin:

polipeptydy środkowego MM (< 30 кД)

regulują siłę i nasilenie reakcji immunologicznych i stanów zapalnych

wydzielane lokalnie

działają jako czynniki parakrynne i autokrynne

siła ponadświatowości (te same cytokiny produkowane są przez różne komórki)

oddziałują z receptorami o wysokim powinowactwie do cytokin na błonach komórkowych

plejotropia (te same cytokiny działają na różne komórki docelowe)

kaskadowanie („granica cytokin”)

synergizm, antagonizm

Klasyfikacja cytokin:

Interleukiny (IL1-IL18) to białka regulujące wydzielanie układu odpornościowego, które zapewniają interakcje mediatorów w układzie odpornościowym i połączenia z innymi układami organizmu.

Interferony (IFNα, β, γ) są środkami przeciwwirusowymi o wyraźnym działaniu immunoregulacyjnym.

Czynniki martwicy maskonurów (TNFα, TNFβ) to cytokiny o działaniu cytotoksycznym i regulacyjnym.

Czynniki wzrostu (GGF, FRE, TGF β) – regulatory wzrostu, różnicowania i aktywności funkcjonalnej komórek.

Czynniki stymulujące tworzenie kolonii (GM-CSF, G-CSF, M-CSF) – stymulatory wzrostu i różnicowania komórek krwiotwórczych.

Chemokiny (RANTES, MCP-1, MIP-1a) – chemoatraktanty dla leukocytów.

Klasyfikacja cytokin ze względu na aktywność biologiczną:

Cytokiny – regulatory reakcji zapalnych:

cytokiny prozapalne (IL-1, IL-6, IL-8, FNPα, IFNγ, MIF)

przeciwzapalne (TRFβ, IL-10, IL-4, IL-13).

Cytokiny są regulatorami typu odporności specyficznej dla antygenu komórkowego (IL-1, IL-2, IL-12, IL-10, IFNγ, TRFβ).

Cytokiny są regulatorami typu odporności humoralnej specyficznej dla antygenu (IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-13, IFNγ, TRFβ).

7. Receptory endocytarne, sygnalizacyjne i wtórne odporności wrodzonej.

Szczególną rolę we wrodzonych reakcjach immunologicznych odgrywają receptory rozpoznania ojcowskiego (PRR, zwłaszcza receptory Toll-podobne – TLR), rozpoznające składniki mikroorganizmów oraz wyzwalane w organizmie endogenne sygnały niepewności. W wyniku wysoce skutecznych mechanizmów wrodzony układ odpornościowy identyfikuje potencjalne patogeny, które rozpoznają LPS, peptydoglikany, lipopeptydy, flagelinę i szereg innych konserwatywnych i niezmiennych cząsteczek strukturalnych.

Dlatego uważa się, że wrodzony układ odpornościowy jest podstawową linią obrony przed drobnoustrojami chorobotwórczymi u osób chorych. Jednym z celów odporności wrodzonej jest wczesne wytworzenie się odporności pomiędzy patogenami i niepatogenami, co jest szczególnie istotne w tkankach granicznych (błony śluzowe traw i dróg gruntowych, skóra itp.).

Receptory rozpoznające wzorce są klasyfikowane według ich specyficzności, liganda, funkcji, lokalizacji i różnic w ewolucji. Ze względu na ich funkcję smród dzieli się na dwie klasy: sygnalizacyjną i endocytotyczną.

Rozpoznawanie wzorców receptorów sygnalizacyjnych obejmują, na przykład, receptory Toll-podobne.

Rozpoznawanie wzorców receptorów endocytozy Na przykład receptory makrofagów są niezbędne do przyłączania, niszczenia i przetwarzania mikroorganizmów przez fagocyty niezależnie od wewnętrznego komórkowego przekazywania sygnału regulacyjnego. Oprócz patogenów rozpoznają także komórki apoptotyczne.

Rozpoznawanie wzorców receptorów błonowych

Kinazy receptorowe

Najpierw w rosnących roślinach odkryto receptory rozpoznające wzór. Większy brak homologicznych receptorów wykazano podczas analizy genomów roślin (370 w ryżu, 47 w Arabidopsis). W przeciwieństwie do receptorów, u zwierząt rozpoznaje się wzór wiążący wewnątrzkomórkowe kinazy białkowe za pomocą białek adaptorowych, receptory dalekiego zasięgu to jedno białko składające się z kilkudziesięciu domen, postkomórkowe, rozpoznaje patogen, wewnątrzkomórkowe, które ma kinazę wodną aktywność i transbłonowość.

Receptory Toll-podobne

Ta klasa receptorów rozpoznaje patogeny w komórkach lub endosomach. Smród został po raz pierwszy zidentyfikowany u Drosophila i indukował syntezę i wydzielanie cytokin niezbędnych do aktywacji układu odpornościowego. Receptory Toll-podobne zidentyfikowano obecnie u wielu gatunków. Stworzenia mają 11 (TLR1-TLR11). Oddziaływanie receptorów Toll-podobnych z ligandami prowadzi do indukcji szlaków sygnałowych NF-kB i kinaz MAP, które z kolei indukują syntezę i wydzielanie cytokin oraz cząsteczek stymulujących prezentację antygenu.

Rozpoznawanie wzorców receptorów cytoplazmatycznych

Receptory węzłowe

Receptory węzłowe to białka cytoplazmatyczne o różnych funkcjach. Zidentyfikowano prawie 20 z nich, a większość z nich można podzielić na dwa główne działy: NOD i NALP. Dodatkowo do tej rodziny receptorów przenoszony jest transaktywator kompleksu histosukcji głowy klasy II i kilka innych cząsteczek. Rozpoznając patogen w środku komórki, receptory dokonują oligomeryzacji i tworzą inflamasom, który aktywuje enzymy do proteolitycznej aktywacji cytokin, na przykład interleukiny 1 beta. Receptory aktywują także szlak sygnalizacyjny NF-kB i syntezę cytokin.

Istnieją dwaj główni przedstawiciele: NOD1 i NOD2. Połącz dwa różne peptydoglikany bakteryjne.

Istnieje 14 białek (NALP1 - NALP14), które są aktywowane przez peptydoglikany bakteryjne, DNA, RNA, paramyksowirus i kwas secynowy. Mutacje któregokolwiek z NALPS powodują nawracające choroby autoimmunologiczne.

Inne receptory typu Nod

Cząsteczki takie jak IPAF i NAIP5/Birc1e również indukują proteolityczną aktywację cytokin u gatunków Salmonella i Legionella.

Helikaza RNA

Wywołują przeciwwirusową odpowiedź immunologiczną po aktywacji wirusowego RNA. SCV mają trzy cząsteczki: RIG-I, MDA5 i LGP2.

Rozpoznawanie wzorców receptorów wydzielanych

Istnieje wiele receptorów rozpoznających ten wzór, na przykład receptory dopełniacza, kolektyny i pentraksyny, które natychmiast przenoszą białko C-reaktywne, nie są tracone w białku, które je syntetyzuje i są wchłaniane przez surowicę krwi. Jedną z najważniejszych kolektyn jest lektyna, która wiąże mannozę; Rozpoznaje szeroką gamę patogenów, w tym mannozę w ścianie komórkowej, która indukuje szlaki lektynowe w celu aktywacji układu dopełniacza.

Podobne artykuły